(一)操作室厭氧環境形成：

　　1.按使用要求放置好必要的附件和器具；

　　2.通電源開照明燈，開溫控儀，調節所需溫度；

　　3.操作室內放入鈀粒(封閉)和干燥劑，并放入美蘭指示紙(封閉)；

　　4.關緊取樣室內外門，并抽真空校驗；

　　5.操作室內氮氣置換：

　　A，把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊

　　B.接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使手套鼓起，關閉閥門，然后扎緊袋口；

　　6.操作室氮氣置換重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續三次氮氣置換。

　　7.操作室第四次置換(混合氣體置換)：(混合氣體配比為N285%、H210%、CO25%)

　　A.調換氣路打開混合氣閥進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關開閉排氣；

　　B.關掉混合氣體閥，并打開閥，使混合氣體經過流量計，調整流量計，流量為每分鐘10ml左右；

　　C.混合氣體重復2-3次轉換，經過上述過程，基本形成厭氧環境。

　　8.操作室內打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后打開美蘭指示紙觀察其情況，不變色為操作室內達到厭氧環境；

　　9.開紫外線燈，室內進行處理，時間按具體實驗自定。

　　(二)菌種的置入和培養：

　　1.檢查取樣室內門并關緊；

　　2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門；

　　3.取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度，然后人工打開氮氣閥進氣，使指針回復零位，關掉氮氣閥。重復操作一次。第三次操作時，然后打開混合氣體閥進混合氣，使指針回復零位，關掉混合氣體閥。取樣室充氮置換三次過程結束；

　　4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數；

　　5.取樣室外門開啟、關緊，再抽低真空度檢驗；

　　6.厭氧培養箱需要連續使用的條件：

　　A.每天在操作室內打開美蘭指示紙觀察，如不正常就重新換氣；

　　B.要連續輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證室內厭氧狀態；

　　C.連續培養運行，更換一次除氧劑和干燥劑。

　　D.操作室內溫度可任意選擇和控制。

　　7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整：調節減壓閥，使輸出壓力左右。

　　厭氧箱發注意事項

　　1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；

　　2.開機前應熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法；

　　3.培養物放入是在操作室內達到優良厭氧環境后放入；

　　4.如發生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持10小時厭氧狀態(超過10小時則根據需要把培養物取出另作處理)；

　　5.經常注意氣路有無漏氣現象；

　　6.調換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；真空泵按要求使用，定期檢查加油。